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杭州賽析科技有限公司銷售部作者
飼料中*的測定液相色譜法
GBT 8381.10-2005
1 本標準規定了以GE-200液相色譜（HPLC）儀測定飼料中磺胺喳唔琳的方法。本標準適用于配合飼料、濃縮飼料和添加劑預混合飼料中磺胺喳唔琳的測定，zui小檢測濃度為5.0 mg/kg.
2 規范性引用文件
下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤內容）或修訂版均不適用本標準，然而，鼓勵根據本標準達成協議的各方研究是否可使用這些文件的版本。凡是不注日期的引用文件，其版本適用于本標準。
3 原理
用甲醇水溶液提取飼料中的磺胺喳嗯琳，離心，過濾，在HPLC儀上分離測定。
4 試荊和溶液
以下所用的試劑，除特別注明外均為分析純試劑；水為蒸餾水，色譜用水符合GB/T 6682一級水的規定。
4. 1 磺胺唾嗯琳標準品:含磺胺唆唔琳（G14HUN402S） 95-0%-
4.2 甲醇:色譜純。
4.3 磷酸鹽溶液:取磷酸二氫鉀3.4 0g 和*5.7 1g ，加水溶解并稀釋至10 00m L
4.4 磺胺喳唔琳標準溶液:準確稱取磺胺喳唔琳（4.1）50 mg,溶于甲醇并稀釋成。. 1 mg/ mL的儲備液，置4℃冰箱中避光保存。有效期1個月。臨用前，取此儲備液用水稀釋成適當濃度的標準工作液。
4.5 提取液:甲醇100 mL+水50 mLo
5 儀器
5. 1實驗室常用儀器設備。
5.2GE-200液相色譜儀配GE-200紫外檢測器）。（
5.3分析天平:感量為。.00 01 g 和。.001g o
5.4旋渦振蕩器。
5.5離心機:4 000 r/mine
5.6針頭過濾器:備孔徑為0. 45 um微孔濾膜。
6 試樣的制備
按GB/T 14699.1規定方法采樣，選取有代表性的飼料樣品，至少500g ，四分法縮減至100g ，磨碎，通過。0.45 mm孔篩，混勻，裝人密閉容器中，避光低溫保存備用。
7 分析步驟
7.1 提取
稱取5g試樣，至0.0 01g ，加人提取液（4.5 ）50 m L，旋渦振蕩器混勻，超聲水浴中提取15min,中間取出搖動1次，然后以4 000 r/min離心5 min,靜置，取上清液過0.45 pm濾膜，供液相色譜測定。
7.2 標準曲線的制備
準確吸取儲備液適量，用水或流動相稀釋成濃度分別為。0.10,0.50,1.00,2.00,10.00ug/m L的磺胺咬唔琳標準溶液，作出標準曲線。
7.3 測定
7.3. 1 色譜條件
色譜柱:C18柱，柱長150m m，柱內徑4.6m m,粒度5m，或VertexC18色譜柱，4.6*150，5um。
流動相:磷酸鹽溶液75ml+甲醇25ml，用前過0.45u m濾膜，并超聲脫氣。
流速: 1 ml/min,
檢測波長:240nm.
進樣量:10ul-20ul
7.3.2 定性與定f方法
根據標準品色譜的保留時間定性，定量由標準曲線或單點校準。
7.4 結果的計算和表述
試樣中磺胺峰PAR,琳的含量按式（1）計算:
X=m1/m*n （1）
式中:
X一試樣中磺胺唆嗯琳的含量，單位為毫克每千克（mg/kg） ;
M1一色譜峰面積對應的磺胺喳唔琳的質量，單位為微克（ug） ;
n— 稀釋倍數;
m—試樣的質量，單位為克（g）。
平行測定結果用算術平均值表示，保留至小數點后1位
重復性
在同一實驗室，由同一操作人員使用同一臺儀器完成的兩個平行測定結果的相對偏差不大于10% ,
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