蛋白質分離純化的幾種方法

2020年11月20日 14:22:31人氣：3434來源：天津市眾邁環保設備科技有限公司

　　蛋白質分離純化的幾種方法

　　分離提純某一種蛋白質時，首先要把蛋白質從組織或細胞中釋放出來并保持原來的天然狀態，不喪失活性。所以要采用適當的方法將組織和細胞破碎。

　　一、常用的破碎組織細胞的方法有：

　　1.機械破碎法

　　這種方法是利用機械力的剪切作用，使細胞破碎。常用設備有，高速組織搗碎機、勻漿器、研缽等。

　　2.滲透破碎法

　　這種方法是在低滲條件使細胞溶脹而破碎。

　　3.反復凍融法

　　生物組織經凍結后，細胞內液結冰膨脹而使細胞脹破。這種方法簡單方便，但要注意那些對溫度變化敏感的蛋白質不宜采用此法。

　　4.超聲波法

　　使用超聲波震蕩器使細胞膜上所受張力不均而使細胞破碎。

　　5.酶法

　　如用溶菌酶破壞微生物細胞等。

　　二、蛋白質分離純化抽提

　　通常選擇適當的緩沖液溶劑把蛋白質提取出來。抽提所用緩沖液的pH、離子強度、組成成分等條件的選擇應根據欲制備的蛋白質的性質而定。如膜蛋白的抽提，抽提緩沖液中一般要加入表面活性劑(十二烷基磺酸鈉、tritonX-100 等)，使膜結構破壞，利于蛋白質與膜分離。在抽提過程中，應注意溫度，避免劇烈攪拌等，以防止蛋白質的變性。

　　三、蛋白質粗制品的獲得

　　選用適當的方法將所要的蛋白質與其它雜蛋白分離開來。比較方便的有效方法是根據蛋白質溶解度的差異進行的分離。常用的有下列幾種方法：

　　1.等電點沉淀法

　　不同蛋白質的等電點不同，可用等電點沉淀法使它們相互分離。

　　2.鹽析法

　　不同蛋白質鹽析所需要的鹽飽和度不同，所以可通過調節鹽濃度將目的蛋白沉淀析出。被鹽析沉淀下來的蛋白質仍保持其天然性質，并能再度溶解而不變性。

關鍵詞：超聲波震蕩器

上一篇：自吸泵用戶注意看那些穩定的方法

下一篇：渣漿泵的軸封一定要細細選擇

全年征稿/資訊合作 聯系郵箱：hbzhan@vip.qq.com

版權與免責聲明: 1、凡本網注明"來源：環保在線"的所有作品，版權均屬于環保在線，轉載請必須注明環保在線，http://www.jxtpzs.com。違反者本網將追究相關法律責任。; 2、企業發布的公司新聞、技術文章、資料下載等內容，如涉及侵權、違規遭投訴的，一律由發布企業自行承擔責任，本網有權刪除內容并追溯責任。; 3、本網轉載并注明自其它來源的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網贊同其觀點或證實其內容的真實性，不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網站或個人從本網轉載時，必須保留本網注明的作品來源，并自負版權等法律責任。; 4、如涉及作品內容、版權等問題，請在作品發表之日起一周內與本網聯系，否則視為放棄相關權利。