南京科捷檢測科技發展有限公司作者
一、概述
鋅是人體*的微量元素,人體內缺鋅會引起嗜眠癥和延緩智力發育,頭發中鋅含量反映了人體健康狀況。微量元素的多少可以反映人體的健康狀況,人發中的金屬元素含量與人群的遺傳和生活條件因素有關。正常人體內鋅含量為1.4-2.5g,分布于人體各組織器官中,其中頭發中鋅的含量為125-250 ug/g。鋅是人體必需的微量元素,在人體內具有重要功能, 對機體生長發育、創傷愈合、免疫預防具有重要的作用[1]。缺鋅可使人體生理功能異常,導致生長發育緩[2]。目前,人發已作為一種理想的活體組織檢查材料,其中的鋅含量標志著人體微量元素鋅含量是否正常。因此,分析人發中鋅含量具有一定意義。
本文建立了原子吸收檢測兒童青少年頭發微量元素鋅分析方法,頭發樣品經過用消化法處理成溶液后,直接將消解液噴入空氣-乙炔火焰中進行鋅離子的測定。結果表明,原子吸收檢測兒童青少年頭發微量元素鋅分析操作簡單,實驗結果準確。值得推薦使用。
二、原子吸收檢測兒童青少年頭發微量元素鋅分析時用的儀器與試劑
1、試劑準備
1000μg·mL-1鋅標準溶液:準確稱取0.1688g醋酸鋅于250mL燒杯中,用1%的稀硝酸使其溶解后,冷卻幾分鐘,移入50mL容量瓶中,用去離子水稀釋至刻度,搖勻,備用。
濃硝酸、過氧化氫,均為分析純,1%的稀硝酸。
2、儀器準備
4520A全自動火焰/石墨爐原子吸收分光光度計(南京科捷分析儀器有限公司),乙炔鋼瓶、無油空壓縮機或空氣鋼瓶,聚乙烯試劑瓶(500 mL),烘箱,可調溫電加熱板(濕灰化法),燒杯(250 mL),容量瓶(50 mL,500 mL),吸量管(5 mL),錐形瓶3個(100 mL),漏斗3個。
三、 原子吸收檢測兒童青少年頭發微量元素鋅分析實驗步驟
1、發樣采集
用不銹鋼剪刀取距發根1~3 cm處的發樣約0.5g,于燒杯中用中性洗滌劑浸泡2 min,然后用自來水沖洗至無泡,這個過程一般須重復2~3次,以保證洗去頭發樣品上的污垢和油膩。后,發樣用去離子水沖洗三次,晾干,置烘箱中于110℃干燥至恒重(約1 h),干燥完畢將頭發樣品剪碎至1 cm左右。
2、發樣的消化處理
分別準確稱取上述處理過的發樣0g、0.2393g(樣品一)和0.2435g(樣品二)于3個100mL錐形瓶中。分別先加入4 mL濃HNO3,稍冷后緩慢滴加2 mL 30% H2O2。蓋上短頸漏斗,待溶液反應穩定后置于電熱板上加熱消解,加熱溫度控制在中檔,消解至溶液澄凈透明。若消解后呈深棕色,應再加少許H2O2,繼續加熱使之變淺,后細心蒸至冒白煙溶液剩余1~2 mL(不可蒸干)。取下冷卻后,加入10mL水微沸數分鐘再至干,放冷,反復處理兩次后用1%的稀硝酸將其移入50mL容量瓶中,稀釋至刻度搖勻。用20mL移液管移取20mL上述溶液于50mL容量瓶中,加去離子水至刻度線搖勻。
3、標準系列溶液的配制
用1mL移液管準確移取1mL 1000ug·ml-1鋅標準溶液于100mL容量瓶中,用蒸餾水稀釋至刻度,搖勻,此溶液鋅的濃度為10μg/ml。在6個50 mL容量瓶中加入上述10.0 μg/mL Zn2+標準溶液0 mL,1.0 mL,2.0 mL,4.0mL,5.0 mL,加入濃HNO3 2滴,用去離子水稀釋至刻度,搖勻。系列鋅標準溶液濃度為0.000 μg/mL,0.200 μg/mL,0.400 μg/mL,0.800 μg/mL,1.000 μg/mL。
4、jia工作條件的選擇與設定
1)分析線的選擇
選擇鋅原子的共振線 213.9 nm作為分析線,因在 213.9 nm波長下沒有鄰近線的干擾。
2)燃料與助燃料流量比的選擇
由實驗結果得出,當空氣流量固定為 5. 5L/ min ,乙炔流量為1. 2L/ min時可顯示較好的靈敏度。即空氣∶ 乙炔 = 4. 5∶ 1 為hao。
3)燈電流的選擇
由實驗測得燈電流為8 mA時靈敏度jia。
4)其他條件的選擇
光譜通帶:選擇 0. 7nm - 1. 4nm為宜。燃燒器高度:應選擇在分析中有大吸收時的高度與位置。
根據所查閱文獻資料,按照表1設置儀器工作條件:
表1.儀器工作條件
波長 (nm) | 狹縫 (nm) | 燈電流 (mA) | 乙炔流量(L/min) | 空氣流量 (L/min) | 燃燒器高度 (mm) |
213.9 | 0.2 | 8 | 0.5 | 5.5 | 5 |
安裝Zn空心陰極燈,用蒸餾水調節儀器的吸光度為0。
四、原子吸收檢測兒童青少年頭發微量元素鋅分析試液的測定
在上述所設定的實驗條件下,按由稀到濃的次序測定標準系列溶液吸光度,并記錄,并繪制標準曲線。在和鋅標準溶液的相同測定條件下,測定發樣的試樣溶液的吸光度,計算頭發中的鋅含量。
五、原子吸收檢測兒童青少年頭發微量元素鋅分析結果計算
1、測定標準溶液,繪制標準曲線
表2. Zn2+的濃度對應吸光度數據表
樣品編號 | Abs | 濃度(ug/mL) | SD | RSD(%) |
標準溶液Zn1 | 0.012 | 0.000 | 0.0008 | 3.8518 |
標準溶液Zn2 | 0.064 | 0.200 | 0.0008 | 1.2386 |
標準溶液Zn3 | 0.124 | 0.400 | 0.0017 | 1.3916 |
標準溶液Zn4 | 0.268 | 0.800 | 0.0031 | 1.1596 |
標準溶液Zn5 | 0.332 | 1.000 | 0.0018 | 0.5437 |
由表2. 繪制出Zn2+離子的A-c曲線如圖1. 所示。
由圖1可知Zn2+標準曲線的方程為 A=0.3267 c + 0.0032。其中,c是Zn2+濃度,單位為μg/mL;A為吸光度。線性相關系數 R=0.99856。
2、頭發中鋅含量的計算
實驗測定空白試液、樣品一和樣品二的吸光度如表3:
表3. 試樣溶液Zn2+的濃度對應吸光度數據表
| 頭發質量(g) | Abs | 濃度(μg/mL) |
空白 | 0.000 | 0.040 | 0.114 |
發樣1 | 0.2393 | 0.302 | 0.916 |
發樣2 | 0.2435 | 0.234 | 0.707 |
實驗測定樣品一和樣品二的吸光度扣除背景吸收后,吸光度分別為0.262和0.194,將其帶入Zn2+標準曲線方程,可得試樣溶液中Zn2+的濃度c,c1 =0.802μg/mL c2 =0.593μg/mL。
再按式(1)計算出發樣中鋅的含量:
ω( Zn) = (1)
式中:ω( Zn)為發樣中鋅的質量百分數 (μg/ g);c為有標準曲線查得消化液中的鋅濃度 (μg/ mL); V為發樣消化液定容體積 (mL);m為發樣質量 ( g) 。
發樣1中鋅含量ω( Zn)1 =
發樣2中鋅含量ω( Zn)2 =
因此,頭發中鋅的平均含量ω( Zn) =
3、分析
參考國內不同年齡段發樣測定見表4,本次實驗測定結果361.67μg/ g高于文獻值中的青年組含量。
表4.文獻各人群發樣鋅含量
造成這種情況可能有多鐘原因:
飲食結構的習慣可能影響頭發中Zn的含量,比如現在的人普遍每天都飲用牛奶,而牛奶中就含有豐富的Zn,過多的Zn攝入量可能通過頭發的生長排出身體。取發樣者飲食結構的改變,生活中偏向攝取富鋅的食品如肉類、蛋類、牡蠣、蟹、花生、杏仁和土豆等,使得體內鋅的含量偏高。其次該同學的生活環境對頭發中鋅的含量也有影響。
本次試樣發樣采集于大學生,主要從事腦力勞動,可能頭發中的Zn含量會高于正常人,即腦力勞動強度的大小可以通過頭發中Zn含量反映出來。
本次實驗樣品處理經過了110℃的高溫烘干,可能會造成頭發中部分有機物分解,即烘干前后樣品質量產生較大差異,使得非揮發性的Zn含量升高。
本實驗中,發樣1鋅含量為418.93μg/ g,發樣2鋅含量為304.41μg/ g。由于此次實驗中操作規范化,且觀察該發樣學生的頭發發現該頭發發梢有分叉等營養不良現象,根部則沒有。所以,造成發樣2鋅含量比發樣1小的原因可能為發樣1中大部分為發根處頭發,鋅含量較高,發樣2中大部分頭發為發尾處頭發,鋅含量相對較低。故在進行平行實驗時,應取距發根相同距離處頭發進行定量分析,以減少誤差。
六、原子吸收檢測兒童青少年頭發微量元素鋅分析結論
吸光度測量的相對誤差應該考慮背景校正。如標準溶液的酸度和未知液的酸度并不嚴格相等,會造成吸光度A有一定的差別。此次實驗通過空白試液扣除背景吸收的方法進行背景校正。并通過兩次測量鋅含量的實驗方法,計算平均值。對于本次實驗可以采取多次平行測定制作鋅標準工作曲線。
本次實驗只是簡單的測定了發樣中的鋅含量,我們還可以拓展出其它與此相關的研究。比如,我們可以研究不同年齡段人的頭發中鋅含量變化,或者頭發中鋅含量和飲食結構的聯xi等,故本次實驗具有好的實踐意義和價值。分析結果表明,本原子吸收檢測兒童青少年頭發微量元素鋅分析方法操作簡單,實驗結果準確。具有一定的使用價值。
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