1、原理及適用范圍

將乳糖膽鹽選擇性培養基和TTC顯色劑加載在紙片上，經培養后能夠在紙片上生長并發酵乳糖產酸的即為大腸菌群陽性，記錄每個稀釋度大腸菌群陽性紙片數，根據大腸菌群MPN表查出相應的大腸菌群數。 食品大腸菌群檢驗紙片法與國標法中的九管法相對應，將原來幾步的試驗簡化為一步，時間由78h縮短為24h以內，省去了制備培養基、消毒和培養器皿的清洗處理等大量輔助性工作，隨時可以打開包裝進行抽樣檢測。 執行標準：食品安全國家標準 食品微生物檢驗大腸菌群計數MPN計數法（GB 4789.3）。

適用于各類食品、飲料等樣品中大腸菌群的快速測定。

2、操作方法

2.1、樣品處理：按無菌操作稱取樣品25g（或25mL）放入含有225mL滅菌磷酸緩沖液稀釋液（或生理鹽水）的取樣瓶或均質杯中，經充分振搖做成1：10的樣品勻液。樣品勻液的pH值應在6.5～7.5之間，必要時用1mol/L氫氧化鈉或1mol/L鹽酸調節。用1mL滅菌吸管吸取1：10樣品勻液，注入含有9mL稀釋液的試管內，振搖試管制成1：100的樣品勻液。根據對樣品污染狀況的估計，按上述操作，一次制成10倍遞增系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋1次，換一支1mL無菌吸管或吸頭。從制備樣品勻液至樣品接種完畢，全過程不得超過15min。

2.2、接種

2.2.1、選取兩個稀釋度進行接種，普通食品一般采用1：10和1：100這兩個稀釋度，飲料采用原液和1：10兩個稀釋度。本品每份由三片大紙片（接10mL，袋中二片疊放算作一大片），六片小紙片（接1mL）組成。

2.2.2、用滅菌吸管吸取10mL 1：10樣品勻液加到含有大紙片的塑料袋中（相當于接樣品1g），吸透后平放，做三個重復。再用1mL滅菌吸管吸取1mL同一稀釋度的樣品勻液加到含有小紙片的塑料袋中（相當于接樣品0.1g），做三個重復。再另取一支1mL滅菌吸管吸取1mL 1：100樣品勻液加到含有小紙片的塑料袋中（相當于接樣品0.01g），做三個重復。

2.3、培養：將接種好的紙片（可疊放）放入36℃±1℃培養箱中培養15～24h。

3、大腸菌群最可能數（MPN）的報告

3.1 若紙片變黃或在黃色背景上呈現紅色斑點為大腸菌群陽性紙片。紙片保持紫藍色不變或在紫藍色背景上呈現紅色斑點，但周圍沒有黃色均為大腸菌群陰性紙片。

3.2 記錄每個稀釋度大腸菌群陽性紙片數，根據《食品飲料大腸菌群MPN表》查出相應的大腸菌群數。

3.3 如接種的個梯度為原液，應將表上查出的結果除以10。

4、注意事項

新的國家標準所用的單位改為每克（或毫升）檢樣中大腸菌群最可能數，標準的接種量為0.333g（mL），MPN表也是由此而設計。而使用本品的標準接種量為3.33g（mL），大紙片接種10mL 1：10樣品勻液相當于1g樣品，因而表內數字應相應降低10倍。飲料樣品的接種量為33.3mL，大紙片接種10mL樣品原液，表內數字應降低100倍。

5、保存條件

本產品需存放在4℃～10℃冰箱中，保質期為一年，鋁箔袋打開后,未用完的紙片要放回鋁箔袋中封好，放到冰箱中，一個月內用完。在高濕度的環境中可能出現冷凝水，在拆封前將整包回溫至室溫。