Countess II FL自動細胞計數儀用途:
細胞計數和進行GFP/RFP表達、凋亡、細胞存活等熒光定量分析。
Countess II FL自動細胞計數儀特點:
1. 處理時間:約10秒即可精確完成細胞計數及細胞內至多2種熒光的定量測定,并提供細胞總數、活細胞數、死細胞數、細胞活率、細胞直徑、直徑分布圖、熒光分布圖和細胞圖片等數據
2. 對焦方式:自動對焦和手動對焦2種方式供實驗者選擇
3. 具有門控功能:可調節細胞的亮度、直徑、圓度和熒光閾值等參數,對感興趣的細胞群進行計數或熒光定量
4. 細胞樣品范圍:1 x 104-1 x 107個細胞/ml
5. 細胞樣品的大小:5-60 µm
6. 樣品量:10 µl,節約寶貴的細胞樣品
7. 光學系統:3通道(明場+2個EVOS® LED光立方插槽),有多種熒光光源可供選擇,可根據應用需求同時選配至多2種熒光光源
8. 可兼容一次性玻片和可重復使用的玻片
9. 程序:已經預設好計數程序并已校準,每次軟件升級后需進行一次校準。
10. Countess自動細胞計數儀配有攝像頭(2.5X光學放大和500萬像素)
所采用的EVOS®光立方
的熒光檢測技術的核心是的EVOS® LED光立方。每個光立方含有一個LED、發光光學器件和濾光片。光立方具有插拔功能,可由用戶更換,并通過Countess®系統進行自動配置。這些類型廣泛的光立方為眾多熒光研究應用(如細胞活力分析)提供了更大的靈活性。
See the entire line of compatible EVOS® light cubes
對應于Countess® II FL全自動細胞計數儀上常用的染料的熒光光立方
光立方 | 激發光譜(nm) | 發射光譜(nm) | 常用的相容染料/熒光蛋白 |
---|---|---|---|
DAPI | 357/44 | 447/60 | DAPI, Hoechst, BFP |
TagBFP | 390/18 | 447/60 | TagBFP |
CFP | 445/45 | 510/42 | ECFP, Lucifer Yellow |
GFP | 470/22 | 510/42 | GFP, Alexa Fluor® 488, SYBR® Green, FITC |
YFP | 500/24 | 524/27 | EYFP, acridine orange (+DNA) |
RFP | 531/40 | 593/40 | RFP, Alexa Fluor® 546, Fluor® 555, Cy®3, DsRed, Rhodamine Red, dTomato |
Texas Red® | 585/29 | 624/40 | Texas Red®, Alexa Fluor® 568, Alexa Fluor® 594, MitoTracker® Red, mCherry |
Cy®5 | 628/40 | 692/40 | Alexa Fluor® 647, Alexa Fluor® 660, DRAQ5® |
Cy®5.5 | 655/46 | 794/16 | Cy®5.5 |
可重復使用或一次性玻片
一次性玻片和槍頭的安裝成本使得很多實驗室打消了了停用繁瑣的手動細胞計數的念頭。為此,Countess® II FL全自動細胞計數儀采用了可選配可重復使用的玻璃玻片的設計,從而顯著降低了自動細胞計數的長期耗材成本。而針對那些希望享受到一次性玻片便利的研究人員,Countess® II FL全自動細胞計數儀也支持使用針對原版Countess®細胞計數儀開發的同款PMMA塑料玻片。
精密、精確地計數
Countess® II FL全自動細胞計數儀內含*的自動聚焦計數和計數算法,使您可以快速、精確地識別并計數細胞群之中的細胞。在插入玻片之后,Countess® II FL全自動細胞計數儀即可自動對細胞進行對焦,從而幫助用戶消除與手動對焦機制有關的人為波動。密度為1 x 104至1 x 107細胞/mL 的懸液之中的大小介于5 μm至60 μm之間的細胞,宜采用此方法進行計數。
采用Countess® II FL全自動細胞計數儀進行精確的細胞計數。在含有0.4%臺盼蘭染色劑溶液的懸液中將NIH/3T3、HeLa和HL-60細胞按照1:1的比例混合,然后通過臺盼藍排除法進行計數。取10 μL的樣品加入到腔室玻片上并將玻片插入到Countess® II FL全自動細胞計數儀中(藍條)或采用血細胞計數儀通過顯微鏡手動計數(紫條)。每一個豎條表示平均10個細胞計數, 標準偏差如圖所示。Countess® II FL全自動細胞計數儀的自動對焦和高級計數算法具有更高的細胞計數精確度,而手動計數則出現了圖示的偏差。
細胞成塊
采用Countess® II FL全自動細胞計數儀時這也不是問題。無論您采用自動還是手動細胞計數方法,在對含有成塊細胞的樣品進行計數時,都難以獲得精確的細胞計數結果。而Countess® II FL全自動細胞計數儀的*計數算法可以清晰地細胞塊內的細胞邊界,因而即使是成團塊樣品也可進行精確、精密的細胞計數。
自動細胞計數 – 即便面對成塊樣品時。在含有0.4%臺盼蘭染色劑溶液的懸液中將NIH/3T3細胞按照1:1的比例混合,然后取10 μL的樣品加入到腔室玻片上并將玻片插入到Countess® II FL全自動細胞計數儀中。Countess® II FL全自動細胞計數儀的分割和計數算法可以對細胞塊進行解析,并根據臺盼藍排除法進行活/死細胞評分。在本實驗之中的樣品之中,共計數出了3.09 x 106的活細胞(不含臺盼藍染色劑)和5.86 x 103的死細胞(積聚了臺盼藍染色劑)。
Countess® II和Countess® II FL全自動細胞計數儀之比較
特征 | Countess® II | Countess® II FL |
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自動對焦 | ||
觸摸屏 | ||
明場計數 | ||
一次性玻片 | ||
可重復使用玻片 | ||
熒光兼容性 | ||
能否升級到熒光檢測 |
技術規格 |
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光學器件 |
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物理特性 |
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可重復使用玻片 |
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一次性分析玻片 |
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計數面積 |
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