第三代免疫分析技術,多因子檢測金標準,電化學發光原理,可應用于細胞因子、信號通路磷酸化蛋白、疾病biomarker檢測,可應用于藥物篩選、PK研究、免疫原性檢測、毒理評估、抗體藥親和力篩選等。
MSD
蛋白分析實驗技術1、MSD超敏電化學發光平臺
針對550位北美和歐洲的高級生物醫藥研究人員的報告中顯示,基于電化學發光技術的MSD(MesoScale Discovery)是受歡迎的5大免疫分析品牌之一。可將Western Blot從16小時縮短至4.5小時。
基本原理:
電化學發光是一種在電極表面由電化學引發的特異性化學發光反應,是電化學和化學發光兩個過程的結合。MSD電化學發光檢測技術使用SULFO-TAGTM標記物,在MULTI-ARRAY和MULTI-SPORT微孔板的電極表面通電后,電化學作用激發SULFO-TAGTM標記物發出強光。
MSD(Meso Scale Discovery)優勢:
1)更高靈敏度與更寬的線性范圍
MSD靈敏度可達0.05pg/ml,有效線性范圍達6log(從亞皮克級到幾萬皮克),能同時兼顧高低豐度蛋白的檢測。傳統 ELISA常規線性范圍在10pg/ml-1000pg/ml,采用Ultra-sensitivity試劑盒則為0.5-10pg/ml。(對比詳情見下圖)
2)樣本兼容度高,基質效應小
MSD平臺由于其的電化學發光原理,可將許多非特異信號予以排除,受樣本性質的影響更小(如粘稠樣本,懸濁顆粒樣 本等),因此對于各類生物學樣本的兼容度高。目前測定樣本包括但不限于:血清,血漿,培養上清,細胞/組織裂解液,腦脊 液,尿液,眼睛房水,灌洗液等生物學樣本。
3)節省樣本用量,可實現多重檢測
傳統ELISA每孔所需樣本量一般為50-100uloMSD通過點陣技術,在96孔石墨電極板里,可實現每孔25卩L樣本,10個指標的 檢測,為珍貴樣本的研究提供了更多的數據。
4)實驗流程簡便、快速、多元化
MSD提供了更為便捷快速的實驗流程,通常只需4-5小時,即可完成整個檢測流程,簡要步驟如下:
4.1V-PLEX
4.2 U-PLEX
5)信號穩定且不受顯色順序影響
MSD由于基于電化學發光原理,信號分子SULFO-TAG需在電激發的情況下才能產生信號,因此整個實驗流程無需避光,每 孔激發與信號采集時長統一,避免了像ELISA底物與終止液加入順序先后所導致的數據差異,不受操作人員技術水平差異 的影響。請見下圖電化學發光平臺示意圖(見后頁)
應用范圍
結果展示
MSD開發試驗
項目
條件摸索
完成標準曲線摸索和樣本初步檢測
完成方法學檢測
包含內容
A、捕獲抗體、檢測抗體、標準品、二抗條件摸索
B、標準曲線摸索和初步樣本測試
C、方法學驗證(整體重復3次)
