檢測方法簡介

1)溫度探頭比對及探頭布置

①探頭校正

試驗開始前將測試用濕熱探頭放到校驗爐內進行溫度校準，低溫探頭設置為低點、高點、測量點。

試驗結束后，將所有的濕熱探頭進行“低點”和“高點”溫度復核，確認試驗后溫度儀表的誤差不大于0.5℃。

②探頭布置

將腔內按三個方向分別切為4個平面，其余溫度探頭均勻地放在腔內各處。各溫度探頭均懸空放置，不與金屬表面接觸。

2）空載熱分布試驗

①布點

將經過校驗的溫度探頭編號（一般為16根探頭），通過設備的驗證接口放入滅菌室內。

加熱介質進口處于設備自身溫度探頭處必須各放一根探頭。

將腔內按三個方向分別切為4個平面，其余溫度探頭其余溫度探頭均勻地放在腔內各處。各溫度探頭均懸空放置，不與金屬表面接觸。

②程序運行

按預定的滅菌程序如 ℃× min進行滅菌，設定采樣間隔，采樣時間不小于滅菌柜的工作周期，包括升、滅菌、降溫過程，啟動滅菌柜，在空載運行狀態下進行熱分布測定，連續運行3次，以確認滅菌過程中的重現性。

③結果評價

“冷點”確定

試驗中，標準探頭得的溫度Z低的區域，即滅菌器內“冷點”的位置。予以特別標注，作為熱穿透試驗和生物指示劑試驗重點監控的位置。

溫度均勻度

每次滅菌程序運行過程中，滅菌器腔室內“冷點”及“熱點”的溫度，與其平均溫度之差應≤±1℃（或符合該設備說明書中標注的設計要求）。

3)滿載熱穿透試驗

①探頭校正：同上。

②物品裝載

一般選擇Z大裝載。如果可能，應選擇包裝Z大裝載方式在內的滅菌實踐中使用各種裝載方式反復進行，每種裝載方式至少應進行3次重復性試驗，以確保試驗的準確性。

③探頭布置

將經過校驗的16個溫度探頭編號，通過設備的驗證接口放入滅菌室內。

加熱介質進口處與設備自身溫度探頭處必須各方一根探頭。

將腔內按三個方向分別切為4個平面，其余溫度探頭均勻地放在腔內各處。各溫度探頭均懸空放置，不與金屬表面接觸。

④程序運行

按預定的滅菌程序如 ℃× min進行滅菌，設定采樣間隔，采樣時間不小于滅菌柜的工作周期，包括升、滅菌、降溫過程，啟動滅菌柜，在空載運行狀態下進行熱分布測定，連續運行3次，以確認滅菌過程中的重現性。

結果評價

“冷點”確定

試驗中，標準探頭得的溫度Z低的區域，即滅菌器內“冷點”的位置。空載熱分布試驗和裝載熱分布試驗測得的“冷點”位置可能不同，分別標注，作為熱穿透試驗和生物指示劑試驗重點監控的位置。

溫度均勻度

滅菌器腔室內“冷點”及“熱點”的溫度，與其平均溫度之差應≤±1℃（或符合該設備說明書中標注的設計要求）。

4)生物指示劑試驗

①滅菌物品的裝載方式

一般為Z大負載，但是如果在實際生產中也采用在Z小負載的情況下滅菌的工藝過程，則應包括Z小負載。

②標準探頭和生物指示劑的布置

選用16支濕熱探頭，編好號，插在待滅菌的產品中，并在這些插有探頭的產品中加入或捆綁適當的生物指示劑：嗜熱脂肪芽孢桿菌。然后將它們放在下述位置

由熱穿透試驗確定的冷點位置（至少1支）；

由熱穿透試驗確定的熱點位置（1支）；

滅菌柜溫度控制探頭附近（1支）；

其它位置平均分配。

③試驗運行

按預定的滅菌程序如 ℃× min進行滅菌，運行過程中T9溫度驗證系統會自動記錄各測點溫度并計算F0值。

注：滅菌產品每一裝載方式的熱穿透和生物指示劑試驗至少應連續進行3次。

④微生物培養

將樣品編好號，按溫度探頭分布圖放入滅菌柜腔內。同滿載熱穿透同時進行。

滅菌后的生物指示劑置50℃～60℃培養24h～48h另取一支做為陽性對照。

⑤結果評價

每種裝載方式下，實驗結果達到Z冷點滅菌物品的F0值不小于該滅菌程序的設定值（一般情況下F0≥12）；

陽性對照培養24小時，應由紫色變為黃色可判為指示劑有效，否則試驗無效；三組共48支滅菌后生物指示劑應全部保持紫色為滅菌合格，若有紫色變黃色為滅菌不合格。

“紫色”表示指示管顯示陰性；“黃色”表示指示管顯示陽性。