操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。
中文名稱:XL10化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
英文名稱:XL10 Chemically Competent Cell
產(chǎn)品規(guī)格:100μl×10管
發(fā)貨周期:1~3天
產(chǎn)品貨號(hào):BJ-F0164558
生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中,常常需要從液體樣品(如血漿,培養(yǎng)基)中純化病毒,但由于病毒顆粒十分細(xì)小,傳統(tǒng)的分離方法是使用長(zhǎng)時(shí)間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來(lái),此操作非常繁瑣,并且病毒在此過(guò)程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn),本公司開(kāi)發(fā)了本產(chǎn)品。
產(chǎn)品介紹:
本品為使用大腸桿菌XL10菌株制備的化學(xué)轉(zhuǎn)化級(jí)感受態(tài)細(xì)胞,轉(zhuǎn)化效率過(guò)108 cfu/μg,廣泛適用于質(zhì)粒轉(zhuǎn)化、基因克隆、藍(lán)白斑篩選等用途。 XL10感受態(tài)細(xì)胞的基因型:Δ(mcrA)183Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lacTet rHte [F′proAB lacI qZΔM15 Tn10(Tet r) Amy Camr] 產(chǎn)品特性 1)XL10品系,具有四環(huán)素(Tetr)和氯(Camr)抗性,新型克隆菌株。 2)適合PCR產(chǎn)物、cDNA以及其他來(lái)源的非甲基化DNA的高效轉(zhuǎn)化。 3)endA1,RecA1突變,確保外源DNA在宿主菌中的穩(wěn)定性,有于高質(zhì)量質(zhì)粒DNA提取。 4)Hte基因型,增大片段DNA轉(zhuǎn)化效率,并使宿主菌細(xì)胞生長(zhǎng)速度大幅度提高。 5)可用于對(duì)重組質(zhì)粒進(jìn)行藍(lán)白斑篩選。 6)轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC19 DNA。 7)無(wú)外源質(zhì)粒DNA殘留。 儲(chǔ)存:-80℃。 |
使用方法:本產(chǎn)品僅用于科研
注意:標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個(gè)人防護(hù)。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級(jí)容器)。
鼻拭子的采集:將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處,停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集:用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁,將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
直接在一級(jí)容器上用油性記號(hào)筆寫(xiě)明樣本的種類(lèi)、采樣時(shí)間、編號(hào)、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封;每袋裝一份標(biāo)本。同時(shí)也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上,連同一級(jí)容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級(jí)容器)內(nèi),擰緊蓋,在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本,可以放在同一個(gè)二級(jí)容器內(nèi)。二級(jí)容器要承受不少于95 KPa的壓力,內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險(xiǎn)標(biāo)注。
將二級(jí)容器擺放在專(zhuān)用運(yùn)輸箱內(nèi)(或疫苗運(yùn)輸箱),放入冰排,然后以柔軟物質(zhì)填充,并密封,由專(zhuān)人(2人)運(yùn)送,不得郵寄,最好使用專(zhuān)車(chē)。
采集的標(biāo)本若不能在24小時(shí)內(nèi)送達(dá),則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無(wú)-70℃條件的,需在4℃冰箱短時(shí)間暫存,并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃~-40℃時(shí)不穩(wěn)定,故長(zhǎng)期保存最好在-70℃溫度以下進(jìn)行。
picric acid-orange G solution 溶液
1% phosphotungstic acid 溶液
酮戊二酸脫氫酶(αketoglutarate dehydrogenase)
糖蛋白標(biāo)準(zhǔn)樣品——辣根過(guò)氧化酶
PCR級(jí)無(wú)離子純水
丙谷二肽,L-丙-谷二肽,力肽 Ala-Gln 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR MouseVascuoarendothelialcellgrowthfactorreceptor,VEGFR-3/Flt-4elisa小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)elisa規(guī)格:96T/48T
L-精甲酯二鹽酸 H-Arg-OMe·2HCl 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)elisa ,英文名: MIP-1β/CCL4 ELISA Kit
D-丙氨酰胺鹽酸鹽 D-Alaninamide 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 大鼠水通道蛋白1(AQP-1)ELISA檢測(cè)試劑盒RatAquaporin1,AQP-1ELISAKit 96T/48T
硝酸芬替康唑; 硝酸芬康唑 Fenticonazole Nitrate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 人催乳素釋放激素(PRH)試劑盒 Human PRH ELISA Kit
1-芐基D-谷 1-Benzyl D-Glutamate 質(zhì)量規(guī)格:0.98 RaeninELISAKit大鼠腎素(Renin)elisa規(guī)格:96T/48T
D-苯丙 D-Phenylalanine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR HIS釣餌(PULLDOWN)檢測(cè)試劑盒5
D-丙 D-Alanine 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR MouseVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1elisa小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)elisa規(guī)格:96T/48T
β-丙 β-Alanine 質(zhì)量規(guī)格:>98% 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP1β)elisa ,英文名: MIP1β ELISA Kit
β-丙(標(biāo)準(zhǔn)品) β-Alanine 質(zhì)量規(guī)格:>98%(T),標(biāo)準(zhǔn)品 人腺嘌呤二核苷酸0酸(NADPH)ELISA檢測(cè)試劑盒Humannicotinamideadeninedinucleotidephosphate,NADPHELISAKit 96T/48T
D-色 D-Tryptophan 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 大鼠血管生成素樣蛋白3(ANGPTL3)試劑盒 Rat Angiopoietin-like 3,ANGPTL3 ELISA KIT
XL10化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞氟蟲(chóng)脲 Flufenoxuron 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,98% 牛轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)試劑盒 Bovine ansforming growth factor β1,TGF-β1 ELISA Kit
氟磺胺草醚 Fomesafen 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5% 牛轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)試劑盒 Bovine ansforming growth factors β2,TGFβ2 ELISA Kit
氟酰胺 Flutolanil 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5% 牛轉(zhuǎn)錄因子P65(RELA)試劑盒 Bovine anscription factor p65,RELA ELISA kit
氟硅唑 Flusilazole 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.8% 牛總蛋白S(TPS)試劑盒 Bovine Total protein S,TPS ELISA Kit
銳勁特 Fipronil 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98% 牛組胺(HIS)試劑盒 Bovine histamine,HIS ELISA kit
丁苯威 Fenobucarb 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99% 脯羥化酶(prolylhydroxylase)活性高效液相色譜定量檢測(cè)試劑盒20
唑螨酯 Fenpyroximate 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5% 其它elisa
精乙基噁唑禾草靈 Fenoxaprop-p-ethyl 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,97% 犬(EPI)試劑盒 Canine Epinephrine/Adrenaline,EPI ELISA Kit
Amberlite® IRC-748螯合型離子交換樹(shù)脂 Amberlite® IRC-748 質(zhì)量規(guī)格: 犬(NO)試劑盒 Canine niic oxide,NO ELISA Kit
Amberlyst15離子交換樹(shù)脂(濕) Amberlyst 15 ion-exchange resin 質(zhì)量規(guī)格:濕 犬17羥酮(17-OHP)試劑盒 Canine 17-Hydroxyprogesterone,17-OHP ELISA Kit
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。