操作規程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養箱培養24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
中文名稱:多點突變試劑盒
英文名稱:Multi Site-Directed Mutagenesis Kit
產品規格:10T
發貨周期:1~3天
產品貨號:BJ-F0164553
生物醫學實驗中,常常需要從液體樣品(如血漿,培養基)中純化病毒,但由于病毒顆粒十分細小,傳統的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來,此操作非常繁瑣,并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統方法的缺點,本公司開發了本產品。
產品介紹:
使用本試劑盒,可一次性向目標質粒上三至五個不連續位點(相距過50bp)同時引入定點突變。該試劑盒由兩個模塊組成:Pfu DNA Polymerase擴增模塊和快速克隆模塊。Pfu DNA Polymerase高的保真度顯著降低了擴增過程中引入新突變的可能性,其的長片段擴增能力,廣泛適用于長度小于20 kb的任何質粒擴增??焖倏寺∠到y用高效的同源重組反應替代傳統的退火成環反應。因此使用本試劑盒進行DNA定點突變時,引物設計更加靈活,且擴增反應以指數方式進行,極大減少了模板使用量,有于原始甲基化模板的*降解。 本試劑盒中的重組酶Exnase MultiS經過優化,專門針對多堿基進行定點突變。此外,如擴增產物特異,其DpnI消化產物可不進行DNA純化而直接用于重組反應。高度優化的反應緩沖液、快捷的操作流程以及*的成功率,使得本產品成為DNA多點突變選試劑盒。 |
使用方法:本產品僅用于科研
注意:標本采集人員需按有關規定做好個人防護。咽、鼻拭子最好在發病的3天采集。
在安全柜內將本產品分裝到自備的、螺旋蓋內有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集:將棉簽輕輕插入鼻道內鼻腭處,停留片刻后緩慢轉動退出。以同一拭子拭兩側鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集:用棉簽擦拭雙側咽扁桃體及咽后壁,將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標本放入大小適合的塑料袋內密封;每袋裝一份標本。同時也將標本有關信息填在標本送檢表上,連同一級容器封于塑料袋內。
將裝標本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內,擰緊蓋,在容器上標明有關信息。同一患者2份以上的密封標本,可以放在同一個二級容器內。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力,內襯具吸水和緩沖能力的物質。所有容器必須印有生物危險標注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(或疫苗運輸箱),放入冰排,然后以柔軟物質填充,并密封,由專人(2人)運送,不得郵寄,最好使用專車。
采集的標本若不能在24小時內送達,則應盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的,需在4℃冰箱短時間暫存,并盡快聯系遞送標本。流感病毒在-20℃~-40℃時不穩定,故長期保存最好在-70℃溫度以下進行。
PGB2
血栓素B2(TXB2)高效液相色譜法定量檢測試劑盒
雙磷脂酰甘油DPG(diphosphatidylglycerol)高效液相色譜法定量檢測試劑盒
磷脂酰乙醇胺PE(phosphatidylethanolamine)高效液相色譜法定量檢測試劑盒
磷脂酰肌醇PI(phosphatidylinositol)高效液相色譜法定量檢測試劑盒
小鼠內脂素(VF)elisa ,英文名: VF ELISA Kit
人泛素激活酶(E1/UBAE)ELISA檢測試劑盒HumanE1/ubiquitin-activatingenzyme,E1/UBAEELISAKit 96T/48T
大鼠抑瘤素M受體(OSMR)免疫試劑盒 Rat Oncostatin-M-specific receptor subunit beta,OSMR ELISA kit
英文名稱HumanCCL2ELISAKit人CCL2規格:96T/48T
非同位素AP-BCIP/NBT法RNA北方雜交試劑盒5次
ELISAKitcath-D人組織蛋白酶D規格:48T/96T
多點突變試劑盒網織紅細胞計數液 16 ml×1 試管法
外切-β-1,4-葡聚糖酶(C1)測試盒
唾液酸苷酶 EC3.2.1.18 10mg/瓶
唾液酸SA測試盒帶SA標準 50管/48樣 比色法
脫氫酶(DHA)測試盒
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。