【產品名稱】:小鼠血管生長素(ANG)ELISA試劑盒
【檢測方法】:酶聯免疫法/酶免法(ELISA)
【產品性狀】:96T/48T,盒裝液體
【貯藏】:2-8°C
【產品有效期】:二年,我公司Elisa試劑盒均為批次,可放心購買。
【產品主要成分】:酶標板,試劑,標準品等。
【標本】:血清/血漿/細胞培養上清液/組織勻漿/組織液/尿液/分泌物
【質量承諾】:我們堅持對產品質量作不斷的評估、創新和改善以確保您對我們產品的高度信任。
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【ELISA試劑盒】提供免費檢測服務:使用我公司試劑盒,只收取試劑盒的費用,其他輔助試劑全部免費。我們將根據實驗工作量和難易程度,雙方協定實驗周期,保質保量完成委托實驗,并將實驗結果和材料用特快專遞免費寄送到您手中。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:2-8℃。
2.有效期:6個月
運輸條件:低溫運輸,用干冰或者冰袋低溫運輸。
小鼠血管生長素(ANG)ELISA試劑盒原理 :
特異性 : This assay has high sensitivity and excellent specificity for detection of Human IL6. No significant cross-reactivity or interference between Human IL6 and analogues was observed.
精密度: Intra-assay Precision (Precision within an assay): CV%<8%
Three samples of known concentration were tested twenty times on one plate to assess.
Inter-assay Precision (Precision between assays): CV%<10%
Three samples of known concentration were tested in twenty assays to assess.
樣本搜集及儲存: Serum: Use a serum separator tube (SST) and allow samples to clot for two hours at room temperature or overnight at 4°C before centrifugation for 15 minutes at 1000 ×g. Remove serum and assay immediay or aliquot and store samples at -20°C or -80°C. Avoid repeated freeze-thaw cycles.
Plasma: Collect plasma using EDTA, or heparin as an anticoagulant. Centrifuge for 15 minutes at 1000 ×g at 2-8°C within 30 minutes of collection. Assay immediay or aliquot and store samples at -20°C or -80°C. Avoid repeated freeze-thaw cycles.
(小鼠血管生長素(ANG)ELISA試劑盒)操作步驟
ELISA試驗時,注意事項如下:
1.正式試驗時,應分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,待檢樣品應作一式二份,以保證實驗結果的準確性。有時本底較高,說明有非特異性反應,可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2.在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1)固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進行篩選:用等量抗原包被,在同一實驗條件下進行反應,觀察其顯色反應是否均一性,據此判明其吸附性能是否良好。
(2)包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質包被的zui適濃度需進行滴定:即用不同的蛋白質濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進行包被后,在其它試驗條件相同時,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數蛋白質來說通常為1~10μg/ml。
(3)酶標記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統里準確地滴定其工作濃度。
(4)酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。
elisa試劑盒的作用:
1.免疫酶染色各種細胞內成份的定位。
2.研究抗酶抗體的合成。
3.顯現微量的免疫沉淀反應。
4.定量檢測體液中抗原或抗體成份。
elisa試劑盒載體的外形主要有:
1.微量滴定板、小珠和小試管。
2.固相載體在ELISA測定過程中作為吸附劑和容器,不介入化學反應。
3.板式及珠式ELISA的標本量一般為100-200ul,而小試管可根據需要加大反應體積,標本反應量的增加有助于試驗敏感性的進步。ELISA試劑盒現在已有多種自動化儀器用于微量滴定板型的ELISA檢測,包括加樣、洗滌、保溫、比色等步驟,對操縱的尺度化極為有利。
小鼠血管生長素(ANG)ELISA試劑盒的保溫:
在建立ELISA方法作反應動力學研究時,ELISA檢測試劑盒實驗表明,兩次抗原抗體反應一般在37℃經1~2小時,產物的天生可達。溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫順4℃等。室溫溫育時要平置于操縱臺上即可。37℃是實驗室中常用的保溫溫度,也是大多數抗原抗體結合的合適溫度。保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外,ELISA檢測試劑盒一般均采用水浴,可將ELISA試劑盒板置于水浴箱中,ELISA板底應貼著水面,使溫度迅速平衡。操縱時的室溫應嚴格限制在劃定的范圍內,尺度室溫溫度是指20~25℃,但詳細操縱時可根據仿單的要求控制溫育。
elisa試劑盒的安全性:
1.避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2.實驗中不要進食、抽煙或使用化妝品。
3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。